mmc_logo
samples
download

MMC Сперм
     
  ММС Сперм - это автоматизированное программное обеспечение для анализа качества спермы в соответствии с параметрами, рекомендованными ВОЗ (Всемирной Организацией Здравоохранения). Данный программный продукт является специализированной версией ПО MultiMedia Catalog с добавлением методик для автоматизации получения спермограммы. ММС Сперм представляет собой основу для компьютерного спермоанализатора (Computer Aided Sperm Analysis System, CASA), который может использоваться в клиниках репродукции человека, для предварительного анализа перед назначением внутриматочной инсеминации, ЭКО (экстракорпорального оплодотворения), в андрологических, урологических лабораториях, в исследовательских институтах, а также в ветеринарии и животноводстве, рыбоводстве для расчета доз при искусственном осеменении.

Запрос демо версии

Наше программное обеспечение зарегистрировано в "Едином реестре российских программ для электронных вычислительных машин и баз данных" за номером 4347.

Варианты комплектации (подробнее об аппартной части анализатора спермы):

 
     
 
ОСНОВНЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ ПРОГРАММЫ:
Скачать pdf
 
 
  • Захват изображений и видеоклипов в формате AVI с устройства ввода изображения.
  • Хранение текстовых данных, изображений и видеоклипов во встроенной базе данных MultiMedia Catalog. Вы можете воспользоваться всеми преимуществами работы с MultiMedia Catalog в приложении к анализу семенного материала. Наша база данных станет надежным помощником для каталогизации данных о пациенте, результатов анализа, видеоклипов движущихся сперматозоидов и изображений окрашенных препаратов. Программа позволяет производить гибкий поиск данных, делать выборки, а также распечатывать информативные и презентабельные сперморграммы для пациентов, содержащие изображения и прочую информацию в том виде, который наиболее удобен для Вашей лаборатории или НИИ.
  • Инструмент для заполнения полей готовыми блоками текста поможет Вам быстро и без ошибок вводить в поля базы стандартные фразы, номенклатуру, названия препаратов и т.п.
  • Автоматический анализ концентрации сперматозоидов и их подвижности на нативных препаратах в соответствии с рекомендациями ВОЗ.
  • Автоматический анализ морфологии сперматозоидов на окрашенных препаратах в соответствии со строгими критериями Крюгера.
  • Ручная оценка концентрации лейкоцитов, клеток сперматогенеза, круглых клеток.
  • Оценка жизнеспособности сперматозоидов.
  • Оценка фрагментации ДНК методом SCD (Sperm Chromatin Dispersion), дисперсия хроматина сперматозоидов.
  • Возможность проводить ручные измерения для решения индивидуальных задач.
 
ММС Сперм: база данных
 
ММС Сперм: морфология
 
     
  ЗАЧЕМ ПОКУПАТЬ:  
 
  • Работать с цифровой видеокамерой гораздо удобнее, чем смотреть в окуляры микроскопа (что, кстати, вредно для зрения).
  • Используя ММС Сперм, Вы получаете возможность записывать все видеоклипы движущихся сперматозоидов на жесткий диск Вашего ПК и проводить анализ в удобное время, не ограничиваясь временем жизни сперматозоидов, и не опасаясь искажения результатов от долгого хранения препарата.
  • Повышается точность анализа морфологии сперматозоидов, поскольку программа оценит каждую снятую клетку.
  • Использование ПО для автоматизированного анализа спермы позволяет снизить влияние "человеческого фактора" на результат анализа. Например, оценка формы головки сперматозоида на глаз весьма субъективна, в то время как программа предложит Вам объективные количественные данные: длина, ширина, площадь, фактор формы. Оценка подвижности спермы также становится более объективной, если известна скорость и точная траектория движения сперматозоида. Но окончательное решение всегда остается за специалистом, и Вы всегда можете внести корректировку в результат автоматического анализа.
  • Используя компьютерный спермоанализатор, проще организовать обучение нового персонала и контролировать результаты работы.
  • База данных для хранения изображений MultiMedia Catalog позволяет создавать неограниченное число записей с любым необходимым набором полей для надежного хранения всей информации о пациентах и быстрого поиска.
  • Поскольку база может работать по локальной сети, Вы сами выбираете наиболее подходящее место для ее хранения (например, на защищенном сервере с автоматизированными процедурами создания резервных копий). Даже если Вы работаете на одном компьютере, Ваши данные будут защищены двухшаговой системой удаления записей в программе MultiMedia Catalog (если Вы удаляете запись, она попадает в корзину и может быть восстановлена).
  • Правильный выбор типов полей в базе позволяет избегать опечаток (Вы не можете вводить текст в числовые поля или в поле для отображения даты и т.д.). Поля с выпадающими списками помогут быстро и без ошибок заполнять базу повторяющейся информацией.
  • Ваши пациенты оценят информативные спермограммы с пояснениями, справочными значениями нормы, изображениями и т.д.
 
     
  ЗАЧЕМ ПРОДАВАТЬ  
 
  • ММС Сперм представляет собой основу компьютерного анализатора спермы (Computer Aided Sperm Analysis System, CASA). Став нашим дистрибьютором, Вы сможете воспользоваться всеми преимуществами системного интегратора: предлагать заказчику соответствующие микроскопы, счетные камеры, одноразовые принадлежности, красители и множество прочего дополнительного оборудования для обеспечения полной поддержки работы Вашего заказчика. Мы всегда готовы поделиться информацией, где и что приобретать по наилучшим ценам. Мы готовы предоставить любые консультации по созданию полноценного компьютерного спермоанализатора и предлагаем полную поддержку заказчика, включая установку системы и обучение.
  • Будучи командой профессиональных разработчиков программного обеспечения для анализа изображений, мы никогда не считаем проект завершенным и всегда готовы прислушиваться к Вашим предложениям по улучшению ПО.
 
     
  МЕТОДИКА ПОДВИЖНОСТЬ  
  Оценка концентрации сперматозоидов и анализ их подвижности производятся на видеоклипах в формате AVI (захваченных в память компьютера или записанных на жесткий диск). Алгоритм анализа построен с учетом требований руководства ВОЗ WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen (5-е издание 2010).  
     
 
Измеряются следующие параметры:
  • VCL  =  криволинейная скорость (микрон/сек). Усредненная по времени скорость движения сперматозоида вдоль его реальной траектории, как она воспринимается в двухмерном пространстве под микроскопом.
  • VSLпрямолинейная скорость  (микрон/сек). Усредненная по времени скорость движения сперматозоида вдоль линии, проведенной между начальной и конечной точкой траектории.
  • VAP  =  средняя скорость по траектории (микрон/сек). Усредненная по времени скорость движения сперматозоида по усредненной траектории.
  • LIN = линейность. Линейность реальной траектории.
  • STR прямолинейность. Линейность средней траектории.
  • BCF = частота биения головки (биений/сек). Средняя частота, с которой реальная траектория сперматозоида пересекает усредненную траекторию.
  • ALH = амплитуда бокового смещения головки. Отклонение головки относительно средней траектории.
  • WOB = колебание. Величина, описывающая колебание реальной траектории относительно усредненной, VAP/VCL.
  • MAD = среднее угловое смещение. Угол поворота головки сперматозоида относительно реальной траектории.
  • Удлиненность головки сперматозоида
  • По всем параметрам ведется статистика
 
 
     
  Основываясь на указанных выше параметрах, сперматозоиды разделяются на классы A, B, C или D (ВОЗ):  
 
  • A = быстрое прямолинейное движение
  • B = медленное или замедленное прямолинейное движение
  • C = непрямолинейное движение
  • D = неподвижность
 
  Кроме того, программа позволяет оценивать концентрацию прочих клеток:  
 
  • лейкоцитов
  • клеток сперматогенеза
  • круглых клеток
 
  При наведении курсора на одну из траекторий во всплывающем окне Вы увидите значения измеренных параметров и результат классификации. Для более детального анализа клип можно воспроизвести заново, перемотать, просмотреть по кадрам. Вы также можете сохранить клип на жестком диске без компрессии, или, используя кодеки, установленные на Вашем компьютере, для экономии места на жестком диске. Пользователь может настраивать порог чувствительности выделения головки сперматозоида. При необходимости, значения пределов классов также могут быть изменены.  
     
  Для контроля количества исследованных клеток (норма - 200 по руководству ВОЗ), на экране отображается количество обнаруженных и отслеженных сперматозоидов. По окончании анализа результаты автоматически передаются в базу. Также в базе выводится статистика по всем параметрам - средние значения для данного образца. Статистику можно выводить на печать. Подробнее см. таблицу автоматических измерений  
     
  МЕТОДИКА МОРФОЛОГИЯ  
  Морфология головки сперматозоида - важный критерий для постановки правильного диагноза. Программа настроена для анализа изображений препаратов, окрашенных по методу Diff-Quik, в соответствии со строгими критериями Крюгера. Мы ориентируемся на краситель Diff-Quik, поскольку это общепризнанный лидер в области быстрой окраски сперматозоидов. По методу Diff-Quik головка сперматозоида окрашивается в темно-голубой цвет с переходом к светло-голубому в зоне акросомы. Такой вариант окраски позволяет производить точный анализ изображения. Для каждого сперматозоида измеряются следующие параметры:  
     
 
  • Площадь головки
  • ELL_B = Большая ось эллипса, описывающего головку, т.е. длина головки сперматозоида.
  • ELL_S = Малая ось эллипса, описывающего головку, т.е. ширина головки сперматозоида.
  • Удл.Э = удлиненность головки сперматозоида.
  • FFE = form factor ellipse Фактор формы, эллипс. Близость формы головки к эллипсу.
  • Акросома = Процент, занимаемый областью акросомы.
  • По всем параметрам ведется статистика

Программа разделяет сперматозоиды на классы Норма и Патология головки, основываясь на параметрах головки. Нажатием правой кнопки мыши Вы можете произвести корректировку результата, а также указать прочие отклонения (патология хвоста, шейки, избыточная остаточная цитоплазма ERC, excess residual cytoplasm).

 
 
 

Имеется также расширенный классификатор морфологических патологий сперматозоидов, позволяющий определять следующие дефекты: дефекты головки (сигарообразные, грушевидные, круглые, без акросомы, круглые-маленькие, аморфные, вакуолизированные, маленькая акросома, двойная головка, точечная головка), дефекты шейки (ломаные, асимметричные, толстые, тонкие), дефекты хвоста (короткие, ломаные, загнутые).

В случае невозможности получения качественного изображения для автоматического анализа (например, из-за неправильной пробоподготовки), можно воспользоваться специальным инструментом для ручного нанесения объектов.

 
  В современной клинической практике принято оценивать такой параметр, как индекс тератозооспермии (teratozoospermia index, TZI). Это значение получается путем деления количества морфологических дефектов на количество анормальных сперматозоидов. По окончании анализа программа автоматически рассчитывает TZI. Значения индекса тератозооспермии находятся в пределах между 1.00 (у каждого патологического сперматозоида один дефект) и 4.00 (у каждого патологического сперматозоида имеются дефекты головки, шейки, хвоста, избыточная остаточная цитоплазма ERC). При использовании расширенного классификатора рассчитывается параметр индекс множественных аномалий (multiple anomalies index, MAI), формула та же, что и у TZI, но значения могут быть больше 4. Подробнее см. таблицу автоматических измерений.  
     
  СТАТИСТИКА ПО ПАРАМЕТРАМ  
 
В базе выводится статистика по всем параметрам, измеряемым в методиках Подвижность и Морфология - средние значения для данного образца. Статистика позволяет сделать дополнительные выводы о качестве спермы. Эти поля базы, как и результаты анализа подвижности и морфологии сперматозоидов, заполняются автоматически в процессе проведения анализа спермы (подробнее см. таблицу автоматических измерений). Статистику можно выводить на печать для представления пациенту, предварительно выбрав соответствующий шаблон отчета (см. ниже). Если эти данные предназначены для внутреннего использования и их не требуется вносить в отчет для пациента, можно выбрать сокращенный шаблон.   ММС Сперм: статистика по параметрам подвижности и морфологии
 
     
  ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ  
     
 
ММС Сперм отчет по жизнеспособности сперматозоидов   ММС Сперм жизнеспособность сперматозоидов
 
     
  Программа позволяет проводить тест на жизнеспособность сперматозоидов (Vitality Test, суправитальное окрашивание). Тест на жизнеспособность сперматозоидов имеет важное клиническое значение и выполняется при наличии в эякуляте менее 40% подвижных сперматозоидов (A+B+С). Процент живых сперматозоидов определяется при помощи специальных красителей, позволяющих визуально идентифицировать клетки, у которых нарушена целостность мембраны. Тест на жизнеспособность сперматозоидов необходимо проводить в течение 30 минут - 1 часа после разжижения эякулята для того, чтобы исключить возможное негативное влияние перепадов температуры и прочих факторов. Результаты теста должны рассматриваться в комплексе с результатами анализа подвижности сперматозоидов на одном и том же образце. Наличие большого количества живых, но неподвижных сперматозоидов может свидетельствовать о структурных нарушениях в развитии хвоста сперматозоида. Большое количество неподвижных и мертвых сперматозоидов (некрозооспермия) может являться показателем эпидидимальной патологии. Спермоанализатор ММС Сперм позволяет автоматически выделять и классифицировать сперматозоиды, окрашенные эозином, рекомендуемое увеличение 40х, светлое поле. В результате методики вычисляется процентное соотношение живых и мертвых сперматозоидов, количество живых, специальное поле проводит автоматическое сравнение со значением нормы. Подробнее см. таблицу автоматических измерений.  
     
  ФРАГМЕНТАЦИЯ ДНК СПЕРМАТОЗОИДОВ  
     
 
ММС Сперм отчет по фрагментации ДНК   ММС Сперм фрагментация ДНК
 
     
  Анализ фрагментации ДНК сперматозоидов предоставляет дополнительную информацию о потенциале фертильности образца спермы, которую невозможно получить путем стандартных тестов подвижности, жизнеспособности и морфологии. Около 30-50% случаев бесплодия у мужчин не поддаются объяснению с помощью стандартных методов (т.н. идиопатическое бесплодие). Большой процент таких случаев бесплодия может объясняться повреждением ДНК сперматозоидов. Для определения фрагментации ДНК мы выбрали метод, основанный на дисперсии хроматина Sperm Chromatin Dispersion (SCD) как самый простой, быстрый и точный метод окраски, который позволяет работать в светлом поле и не требует дорогих флуоресцентных микроскопов и красителей (Fernández et. al., Journal of Andrology 2003 Jan-Feb;24(1):59-66). При использовании данного метода образцы спермы помещаются в агарозный микрогель, последовательно обрабатываются кислым денатурирующим раствором, лизирующим раствором, промываются, после чего сушатся и окрашиваются. При этом вокруг сперматозоидов, содержащих целую, нефрагментированную ДНК образуются чётко различимые ореолы (halo), а вокруг сперматозоидов, содержащих фрагментированную ДНК, образуются небольшие ореолы или ореолы отсутствуют. Деградировавшие сперматозоиды не имеют ореолов и характеризуются бледной, неинтенсивной окраской. Для подготовки препаратов можно использовать наборы типа Halosperm или обратиться к нам за более дешевой альтернативой.

Спермоанализатор ММС Сперм позволяет автоматически выделить на изображении сперматозоиды и их ореолы, а также рассчитать процентное соотношение сперматозоидов с фрагментированной ДНК и нормальных сперматозоидов. Методика работает с использованием светлопольного объектива 40x. Сперматозоиды разделяются на классы: большой ореол, средний ореол, малый ореол, без ореола, деградировавшие.
 
     
 
ММС Сперм, фрагментация ДНК большой ореол ММС Сперм, фрагментация ДНК средний ореол ММС Сперм, фрагментация ДНК малый ореол ММС Сперм, фрагментация ДНК без ореола ММС Сперм, фрагментация ДНК деградировавший сперматозоид
Большой ореол Средний ореол Малый ореол Без ореола Деградировавший
 
     
  Вычисляется индекс фрагментации ДНК спермы DFI (DNA Fragmentation Index), представляющий процент фрагментированных сперматозоидов (малый ореол, без ореола, деградировавшие. DFI менее 15% является показателем отличного потенциала фертильности спермы, DFI между 15% и 30% - показатель хорошей фертильности, а DFI более 30% сигнализирует о возможных проблемах фертильности. Распределение классов сперматозоидов отображается в спермограмме с помощью графиков (столбчатых или секторных диаграмм). Отдельное поле используется для автоматического сравнения с нормальным значением, еще одно поле автоматически заполняется описанием результата анализа в соответствии со значением индекса фрагментации. Подробно см. описание параметров ниже.  
     
  ВЕТЕРИНАРИЯ И ПЛЕМЕННОЕ ЖИВОТНОВОДСТВО  
  Анализатор качества спермы ММС Сперм успешно используется в ветеринарии, племенном животноводстве, рыбоводстве (об использовании комплекта ММС Сперм с цифровой камерой MMC-31C12-M см. статью Оценка подвижности сперматозоидов осетровых рыб в условиях аквакультуры УО Белорусская государственная сельскохозяйственная академия), пчеловодстве, в зоопарках для анализа качества спермы и автоматического расчета количества доз для искусственного осеменения, которые можно получить из имеющегося образца спермы. Искусственное осеменение имеет ряд преимуществ перед естественным спариванием, например, возможность перевозки замороженной спермы в удаленные хозяйства, более эффективного использование спермы ценных экземпляров породистых животных, использование для преодоления отказа животных от спаривания (например, в заповедниках и зоопарках для получения потомства у редких и исчезающих видов животных). Успех искусственного осеменения напрямую зависит от качества материала, поэтому применение компьютерного анализа спермы на племпредприятиях давно вошло в мировую практику.  
  В программе ММС Сперм имеются специальные возможности для расчета доз. В установках программы можно задать следующие параметры:
  • Объем дозы - объем сосуда, в который планируется разливать сперму (ампулы, пробирки, соломины и т.п.)
  • Количество сперматозоидов - требуемое количество спермиев в дозе.
  • По умолчанию расчет производится на основании результатов работы методики Подвижность - процент спермиев с прямолинейно-поступательным движением.
  • Учитывать жизнеспособность - учет процента живых сперматозоидов в образце, если проводился анализ жизнеспособности спермиев.
  • Учитывать морфологию - учет процента сперматозоидов с нормальной морфологией, если проводился анализ морфологии спермиев.
По окончании анализа качества семени программа автоматически рассчитает количество доз спермы для искусственного осеменения и количество разбавителя, который необходимо добавить к исследуемому образцу спермы для получения такого количества доз.
 
     
   
 
     
  ОТЧЕТЫ  
  Результаты анализа (сермограмму) можно распечатать на основе пользовательских RTF (reach text format) шаблонов. Спермограмма заполняется автоматически в соответствии с установками, заданными пользователем в базе данных. Доступны следующие возможности: группировка данных, изменения порядка отображения, отключаемый вывод полей базы (поля для служебного пользования), изображений и т.д. Шаблон спермограммы можно изменять при помощи любого текстового редактора, поддерживающего формат RTF. Если у Вас возникнут особые пожелания, мы поможем Вам настроить печать спермограммы.  
 
MMC Sperm Statistics MMC Sperm Statistics MMC Sperm Statistics
     
 
     
  АППАРАТНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ  
  Поскольку ММС Сперм работает в составе компьютерного анализатора спермы, имеются некоторые особые требования к аппаратному обеспечению подобных систем. Собрать все компоненты такой системы анализа изображений не столь сложно, и пользователь может заняться этим сам, но мы рекомендуем обратиться к ближайшему дистрибьютору для того, чтобы получить все оборудование от одного поставщика. Подробнее о подборе микроскопа, цифровой камеры, компьютера.  
     
  Компьютерный анализатор спермы состоит из персонального компьютера, на котором установлено ПО для анализа спермы, микроскопа с камерой и специальной счетной камеры для оценки подвижности сперматозоидов.  
     
  Требования к ПК  
  Не рекомендуется использовать ноутбуки! Желательно полноценный настольный ПК или моноблок с производительными компонентами.
  • Чипсет Intel (чипсеты AMD не использовать!), желательно с маркировкой Z (например, Z270).
  • Процессор Intel i5, i7, i9, Xeon, 7го поколения с графикой Intel HD Graphics 630 или выше. Проверяйте спецификации процессоров на intel.ru.
  • Минимум 8 Gb RAM DDR4
  • Свободный порт USB 3.0
  • 64-разрядные ОС Windows 10 (Windows 7, 8 поддерживаются)
  • Microsoft .NET Framework v4.0 или выше. Дистрибутивный пакет Microsoft .NET Framework 4.0 устанавливает среду .NET Framework и связанные с ней файлы, необходимые для запуска приложений, созданных для работы в среде выполнения .NET Framework. Если Вы не обнаружили этот пакет в списке ПО на Вашем компьютере (Пуск - Панель управления - Установка и удаление программ), пожалуйста, скачайте его с сайта Microsoft.
При необходимости использования ноутбука рекомендуются только процессоры с маркировкой HQ или HK:
  • Intel Core i7-7700HQ
  • Intel Core i7-7820HQ
  • Intel Core i7-7820HK
  • Intel Core i7-7920HQ
 
     
  Счетная камера  
 

Для анализа подвижности используются счетные камеры с фиксированной глубиной MMC-SR. Камера имеет известную глубину 10 микрометров и позволяет расположить сперматозоиды в одной фокальной плоскости. Поскольку после проведения калибровки программа всегда "знает" площадь кадра, то при известной глубине камеры можно автоматически подсчитать концентрацию.

При небольших объемах анализов спермы в лаборатории используйте многоразовую счетную камеру MMC-SR.

При больших объемах исследований используются одноразовые счетные камеры и стекла.

  MMC-SR счетная камера 10 микрон с покровным стеклом
 
     
  Микроскоп  
 
  • Тринокулярный прямой лабораторный микроскоп проходящего света с возможностью размещения камеры.
  • Адаптер для камеры в соответствии с размером матрицы. Мы рекомендуем датчик изображения размером не менее 1/2" в сочетании с 1.0x адаптером.
  • Светоделитель 100/0 (весь свет на камеру).
  • Осветитель от 30 Вт при использовании галогенной лампы, рекомендуется LED, поскольку на микроскопах с плохой стабилизацией источника питания возможно мерцание изображения при частоте 60 к/с (анализ подвижности).
  • Рекомендуется негативный фазовый контраст, но можно работать и в светлом поле. Программа может выделять как темные объекты на светлом фоне, так и светлые объекты на темном фоне.
  • Объектив 10x для подвижности. Если используется многоразовая камера типа Makler и объектив 20х, объектив должен иметь рабочее раccтояние около 1.8 мм. При использовании нашей счетной камеры MMC-SR объектив с увеличенным рабочим расстоянием не требуется. В случае использования одноразовых стекол типа Leja можно применять обычный объектив.
  • Объектив 40x, светлое поле для оценки жизнеспособности сперматозоидов (суправитальное окрашивание).
  • Объектив 100x, масляная иммерсия для морфологии.
  • Необходим объект-микрометр для калибровки.
  • Подробнее о выборе микроскопа.
 
     
  Камера  
  В комплекте с ПО ММС Сперм необходимо использовать только цифровые камеры с прямыми драйверами. Обратитесь к нам за рекомендациями по следующим причинам:  
 
  • Мы порекомендуем камеры, сохраняющие баланс между качеством получаемого изображения, скоростью видео и разумной ценой.
  • Интерфейс USB 3.0 позволяет присоединить камеру к любому компьютеру или ноутбуку. Единственное требование - современный чипсет для сохранения максимальной частоты кадров видео.
  • Для оценки подвижности сперматозоидов клип с частотой 60 к/с и разрешением 1.3 Мп и более анализируется непосредственно из памяти ПК без записи на диск (при необходимости запись происходит после анализа по нажатию отдельной кнопки, возможно использование кодеков для уменьшения размера файла). При использовании сторонних камер Вам всегда придется записывать видео, что увеличивает время анализа и занимает место на жёстком диске.
  • Прямые драйверы позволяют сохранять и автоматически загружать все настройки камеры, сделанные пользователем для оптимальной работы по всем методикам.
  • Наши прямые драйверы обеспечивают гибкую настройку всех необходимых параметров камеры, в том числе для исследовательской работы и специальных задач.
  • Подробнее о логике подбора микроскопа, цифровой камеры, компьютера
 
     
  Системы контроля температуры  
  Для поддержания постоянной температуры 37°С при анализе концентрации и подвижности сперматозоидов в нативном препарате рекомендуется использовать точные системы контроля температуры с микропроцессорным управлением. MMCSoft предлагает специальный комплект счетная камера MMC-SR c нагревательным боксом MMC-SRH: для нашей счетной камеры вместо обычного нагревательного столика изготовлен специальный бокс, внутрь которого помещается камера для более равномерного нагревания.  
     
  ПОДГОТОВКА ПРЕПАРАТОВ  
  MMCSoft предлагает полное обучение специалиста работе на спермоанализаторе ММС Сперм. В обучение также входят и все детали пробоподготовки. Ниже представлены некоторые основные особенности, с которыми Вам предстоит столкнуться.  
     
  Подвижность  
  Оценка концентрации и подвижности сперматозоидов производится при помощи специальных счетных камер MMC-SR, которые имеют известную глубину, и позволяют распределить клетки в один слой для того, чтобы сперматозоиды свободно двигались и находились в фокусе во время анализа. Счетные камеры для спермы позволяют работать с неразбавленными препаратами. Обычно пробоподготовка заключается в аккуратном размешивании препарата. При этом нужно избегать появления пузырьков. Если в препарате повышенный уровень слизи, можно несколько раз пропустить его через иголку шприца для достижения более равномерной консистенции.

При высокой концентрации сперматозоидов может возникнуть ситуация, при которой анализ подвижности затрудняется в связи с тем, что сперматозоиды часто сталкиваются друг с другом
 
     
  Морфология  
  Для получения качественных изображений препаратов для оценки морфологии сперматозоидов необходима определенная подготовка. Для того чтобы избавиться от возможных посторонних объектов, нужно разбавить сперму и удалить семенную плазму путем центрифугирования. Образец разбавляют соответствующим объемом физиологического раствора для достижения максимальной концентрации, но не более 80 x 10^6/ml. Препарат в объеме кратном 0.2-0.5 ml, в зависимости от концентрации, разбавляют до 10 ml физиологическим раствором комнатной температуры. Пробирка центрифугируется при 800g в течение 10 минут, большая часть надосадочной фракции удаляется. Осадок размешивают в остатках физраствора, обычно 20-40 µl, аккуратно взбалтывая пробирку. Далее 5-10 µl полученной суспензии помещаются на предметное стекло микроскопа, и капля распределяется по стеклу. Приготовление мазка описано ниже.  
     
  ММС Сперм: подготовка мазка для оценки морфологии сперматозоидов  
  Приготовление мазка для окраски сперматозоидов и изучения морфологии. (a) Капля спермы (S) помещается на стекло и распределяется вторым стеклом под углом 45 °. (b) Метод с использованием пипетки. Капля спермы (S) помещается на стекло и распределяется пипеткой (P), удерживаемой горизонтально.  
     
  Приготовление мазков. На случай проблем с окраской необходимо подготовить как минимум два мазка из свежего образца спермы. Стекла должны быть тщательно очищены и промыты в 70% этиловом спиртe. Затем капля образца (от 5 до 20 µl) помещается на стекло. Если концентрация спермы, установленная по методике Подвижность превышает 20 x 10^6/ml, то можно использовать 5 µl спермы. Если концентрация меньше 20 X 10^6/ml, то потребуется капля 10-20 µl. Технику с использованием второго стекла (см. рисунок) нужно применять осторожно, чтобы не повредить сперматозоиды, а также следить за тем, чтобы мазок не был слишком толстым. Эта техника хорошо подходит для образцов с низкой вязкостью. Можно так же поступить следующим образом: поместив каплю на одно стекло, накрыть его вторым и подождать, пока сперма распределится между стеклами, затем аккуратно разделить стекла. В результате Вы получите два мазка.  
     
  Diff-Quik  
  Программа настроена на работу с красителем Дифф-Квик (Diff-Quik). Краситель Diff-Quik рекомендован ВОЗ и является распространенным методом быстрой окраски сперматозоидов. Обычно, набор Diff-Quik имеет следующий состав:  
 
  • Фиксатор, раствор триарилметана в метаноле.
  • Краситель номер 1, красный: ксантин (eosinophilic xanthene).
  • Краситель номер 2, синий: тиазин (basophilic thiazine).
 
  Применение красителей типа Diff-Quik:  
 
  • Мазок, приготовленный, как описано выше, погрузить в фиксатор на 15 секунд.
  • Промокнуть избытки раствора, поставив стекло вертикально на бумагу.
  • Погрузить в краситель номер 1 на 10 секунд.
  • Промокнуть избытки раствора, поставив стекло вертикально на бумагу.
  • Погрузить в краситель номер 2 на 5 секунд.
  • Промыть стекло под струей воды 10-15 раз для удаления излишков красителя.
 
  Для получения хорошей окраски, пожалуйста, следуйте инструкциям производителя Вашего набора Diff-Quik!  
     
  Жизнеспособность  
  Анализатор качества спермы ММС Сперм имеет два режима анализа жизнеспособности сперматозоидов: ручной и автоматический. В ручном режиме может использоваться любая окраска: эозин, эозин-нигрозин, гипоосматическое набухание или флуоресцентные красители. Автоматический анализ настроен на использование красителя эозин Y (Eosin Y, цветовой показатель 45380) - это самый простой, быстрый и доступный метод окраски сперматозоидов. Подготовка реагентов:
  • NaCl, 0,9% (w/v): растворите 0,9 г NaCl в 100 мл дистиллированной воды.
  • Эозин Y, 0,5% (w/v): растворите 0,5 г эозина Y (цветовой показатель 45380) в 100 мл 0,9% NaCl.
  • Если вы используете водный раствор эозина, имейте в виду, что некоторые растворы эозина являются гипотоническими водными растворами. Они могут негативно повлиять на сперматозоиды и привести к получению ложноположительных результатов. При применении подобных растворов добавьте 0,9 г NaCl к 100 мл раствора для увеличения осмолярности.
Процедура:
 
     
  Термины, используемые для описания нарушений спермы  
  Аспермия (aspermia) - отсутствие эякулята.  
  Астенозооспермия (asthenozoospermia) - низкое количество подвижных сперматозоидов (класс А меньше 25% или A+B меньше 50%).  
  Астенотератозооспермия (asthenoteratozoospermia) - недостаточный процент подвижных (классы A+B) и морфологически нормальных сперматозоидов.  
  Азооспермия (azoospermia) - отсутствие сперматозоидов в эякуляте.  
  Криптозооспермия (cryptozoospermia) - предельно малое количество сперматозоидов, которые удается обнаружить только в осадке после центрифугирования.  
  Гемоспермия (haemospermia, haematospermia) - наличие эритроцитов в эякуляте.  
  Лейкоцитоспермия (так же лейкоспермия, пиоспермия, leukospermia, leukocytospermia, pyospermia) - наличие избыточного количества лейкоцитов в эякуляте.  
  Некрозооспермия (necrozoospermia) - низкий процент живых сперматозоидов в эякуляте.  
  Нормозооспермия (normozoospermia) - общее количество или концентрация сперматозоидов, процент подвижных (классы A+B) и морфологически нормальных сперматозоидов соответствуют норме или выше нормы.  
  Олигоастенозооспермия (oligoasthenozoospermia) - концентрация и процент подвижных сперматозоидов (классы A+B) ниже нормы.  
  Олигоастенотератозооспермия (oligoasthenoteratozoospermia) - концентрация, количество подвижных сперматозоидов (классы A+B) и количество морфологически нормальных сперматозоидов ниже нормы.  
  Олиготератозооспермия (oligoteratozoospermia) - концентрация и процент морфологически нормальных сперматозоидов ниже нормы.  
  Олигозооспермия (oligozoospermia) - общее количество или концентрация сперматозоидов, ниже нормы.  
  Тератозооспермия (teratozoospermia) - процент морфологически нормальных сперматозоидов ниже нормы.  
     
  Автоматические измерения и поля базы  
     
  Программа автоматически измеряет большой набор параметров, который постоянно обновляется. Для передачи параметра в базу необходимо создать числовое поле с зарезервированным идентификатором (внутренним именем поля, которое дается при создании поля - не путать с названием поля, которое можно редактировать в свойствах поля). Таким образом, для добавления нового измерения необходимо не только обновить программу (при обновлении программа в целях безопасности не меняет вашу базу), но и добавить числовое поле с определенным идентификатором - в него начнут автоматически добавляться результаты. В таблице ниже приведены актуальные параметры и соответствующие им идентификаторы полей.  
     
 
Параметр Идентификатор поля
Объем образца. Значение этого поля учитывается при расчете общего количества сперматозоидов и количества живых сперматозоидов в образце. Заполняется пользователем. Volume
Подвижность  
Количество сперматозоидов, измеренных на всех видеороликах в результате работы методики Подвижность. Используется для контроля качества работы лаборанта - по требованиям ВОЗ необходимо исследовать не менее 200 сперматозоидов. CountMotility
Количество полей зрения, на которых производились измерения в методике Подвижность. Используется для контроля качества работы лаборанта - по требованиям ВОЗ необходимо исследовать не менее пяти полей. MotilityFrames
Концентрация сперматозоидов, в миллионах на миллилитр. Concentration
Концентрация, норма - результат сравнения с пределом нормы, заданным в установках программы. Значения поля - ДА или НЕТ. statusConc
Объем образца. Значение этого поля необходимо при расчете общего количества сперматозоидов в образце. Заполняется пользователем. Volume
Общее количество сперматозоидов в образце. Рассчитывается с учетом значения поля Объем. При отсутствии значения в поле Объем, количество не рассчитывается. Используется для расчета количества живых сперматозоидов по методике Жизнеспособность Заполняйте поле объем перед началом анализа! TotalCount
Количество, норма - результат сравнения с пределом нормального количества сперматозоидов в образце, заданным в установках программы. Значения поля - ДА или НЕТ. statusTotal
A+B, % - процент прогрессивно подвижных сперматозоидов в образце. A_plus_B
А+В, норма - результат сравнения с пределом нормального процента прогрессивно подвижных сперматозоидов в образце, заданным в установках программы. Значения поля - ДА или НЕТ. statusPR
A+B+C, % - общий процент подвижных сперматозоидов в образце, с учетом непрогрессивно подвижных. ABC
А+В+С, норма - результат сравнения с пределом нормального процента подвижных сперматозоидов в образце, заданным в установках программы. Значения поля - ДА или НЕТ. statusPR_NP
Класс A, % - процент сперматозоидов, двигающихся быстро и прямолинейно. Class_A
Класс A, млн/мл - концентрация сперматозоидов, двигающихся быстро и прямолинейно. A_conc
Класс A, кол-во, млн - количество сперматозоидов, двигающихся быстро и прямолинейно. A_total
Класс B, % - процент сперматозоидов, двигающихся прямолинейно, но медленно. Class_B
Класс B, млн/мл - концентрация сперматозоидов, двигающихся прямолинейно, но медленно. B_conc
Класс B, кол-во, млн - количество сперматозоидов, двигающихся прямолинейно, но медленно. B_total
Класс C, % - процент сперматозоидов, двигающихся непрямолинейно. Class_C
Класс C, млн/мл - концентрация сперматозоидов, двигающихся непрямолинейно. C_conc
Класс C, кол-во, млн - количество сперматозоидов, двигающихся непрямолинейно. C_total
Класс D, % - процент неподвижных сперматозоидов. Class_D
Класс D, млн/мл - концентрация неподвижных сперматозоидов. D_conc
Класс D, кол-во, млн - количество неподвижных сперматозоидов. D_total
A_VCL - среднее значение параметра VCL для сперматозоидов класса A. A_VCL
A_VSL - среднее значение параметра VSL для сперматозоидов класса A. A_VSL
A_VAP - среднее значение параметра VAP для сперматозоидов класса A. A_VAP
A_ALH - среднее значение параметра ALH для сперматозоидов класса A. A_ALH
A_BCF - среднее значение параметра BCF для сперматозоидов класса A. A_BCF
A_LIN - среднее значение параметра LIN для сперматозоидов класса A. A_LIN
A_STR - среднее значение параметра STR для сперматозоидов класса A. A_STR
A_WOB - среднее значение параметра WOB для сперматозоидов класса A. A_WOB
A_MAD - среднее значение параметра MAD для сперматозоидов класса A. A_MAD
B_VCL - среднее значение параметра VCL для сперматозоидов класса B. B_VCL
B_VSL - среднее значение параметра VSL для сперматозоидов класса B. B_VSL
B_VAP - среднее значение параметра VAP для сперматозоидов класса B. B_VAP
B_ALH - среднее значение параметра ALH для сперматозоидов класса B. B_ALH
B_BCF - среднее значение параметра BCF для сперматозоидов класса B. B_BCF
B_LIN - среднее значение параметра LIN для сперматозоидов класса B. A_LIN
B_STR - среднее значение параметра STR для сперматозоидов класса B. B_STR
B_WOB - среднее значение параметра WOB для сперматозоидов класса B. B_WOB
B_MAD - среднее значение параметра MAD для сперматозоидов класса B. B_MAD
C_VCL - среднее значение параметра VCL для сперматозоидов класса C. C_VCL
C_VSL - среднее значение параметра VSL для сперматозоидов класса C. C_VSL
C_VAP - среднее значение параметра VAP для сперматозоидов класса C. C_VAP
C_ALH - среднее значение параметра ALH для сперматозоидов класса C. C_ALH
C_BCF - среднее значение параметра BCF для сперматозоидов класса C. C_BCF
C_LIN - среднее значение параметра LIN для сперматозоидов класса C. C_LIN
C_STR - среднее значение параметра STR для сперматозоидов класса C. C_STR
C_WOB - среднее значение параметра WOB для сперматозоидов класса C. C_WOB
C_MAD - среднее значение параметра MAD для сперматозоидов класса C. C_MAD
D_VCL - среднее значение параметра VCL для сперматозоидов класса D. D_VCL
D_VSL - среднее значение параметра VSL для сперматозоидов класса D. D_VSL
D_VAP - среднее значение параметра VAP для сперматозоидов класса D. D_VAP
D_ALH - среднее значение параметра ALH для сперматозоидов класса D. C_ALH
D_BCF - среднее значение параметра BCF для сперматозоидов класса D. D_BCF
D_LIN - среднее значение параметра LIN для сперматозоидов класса D. D_LIN
D_STR - среднее значение параметра STR для сперматозоидов класса D. D_STR
D_WOB - среднее значение параметра WOB для сперматозоидов класса D. C_WOB
D_MAD - среднее значение параметра MAD для сперматозоидов класса C. D_MAD
Лейкоциты, млн/мл - концентрация лейкоцитов, результат подсчета на видеоролике в методике Подвижность. WBC
Эритроциты, млн/мл - концентрация эритроцитов, результат подсчета на видеоролике в методике Подвижность. ImmatureCell
Круглые клетки, млн/мл - концентрация круглых клеток (без дифференциации), результат подсчета на видеоролике в методике Подвижность. RoundCell
Жизнеспособность  
Количество измеренных, жизнеспособность - количество сперматозоидов, измеренных в результате работы методики Жизнеспособность. Используется для контроля качества работы лаборанта. Необходимо оценить не менее 200 сперматозоидов. VitTotal
Жизнеспособность, % - процент живых сперматозоидов, результат работы методики Жизнеспособность. Vitality
Мертвые, % - процент мертвых сперматозоидов, результат работы методики Жизнеспособность. Dead
Жизнеспособность, норма результат сравнения со значением нормы в установках программы. Значения поля Да или Нет. statusVit
Количество живых - количество живых сперматозоидов в образце. Расчёт основан на значении общего количества сперматозоидов, полученного в результате работы методики Подвижность. live_total
Морфология  
Количество сперматозоидов, измеренных на всех изображениях в результате работы методики Морфология. Используется для контроля качества работы лаборанта - по требованиям ВОЗ необходимо исследовать не менее 200 сперматозоидов. CountMorphology
Нормальная морфология, % - процент сперматозоидов, имеющих нормальные морфологические характеристики, измеренных на всех изображениях в результате работы методики Морфология. Norm
Морфология, норма - результат сравнения с пределом нормы, заданным в установках программы. Значения поля - ДА или НЕТ. statusMorph
В методике Морфология все патологические формы рассчитаны в двух вариантах - % от измеренных (процентная доля сперматозоидов с данной патологией среди всех сперматозоидов, измеренных в рамках работы методики) и % от патологических (процентная доля сперматозоидов с данной патологией среди патологических сперматозоидов, измеренных в рамках работы методики, используется для демонстрации превалирующей формы патологии в образце). Идентификатор поля для % от патологических отличается добавлением буквы P.  
Параметры % от измеренных, упрощенный классификатор:  
Патология головки. HeadPathology
Патология шейки. NeckPathology
Патология хвоста. TailPathology
ERC - excess residual cytoplasm избыточная остаточная цитоплазма. ERC
Параметры % от патологических, упрощенный классификатор:  
Патология головки. HeadPathologyP
Патология шейки. NeckPathologyP
Патология хвоста. TailPathologyP
ERC - excess residual cytoplasm избыточная остаточная цитоплазма. ERCP
Параметры % от измеренных, расширенный классификатор:  
Сигарообразные головки Tapered
Грушевидные головки Pyriform
Аморфные головки, тип 1 - грушевидная аморфная. Amorphous1
Аморфные головки, тип 2 - сигарообразная аморфная. Amorphous2
Аморфные головки, тип 3 - овальная аморфная. Amorphous3
Вакуолизированные головки Vacuolated
Круглые головки без акросомы Round_no_acrosome
Круглые, маленькие головки Round_small
Головки с маленькой акросомой Small_acrosome
Двойные головки Double_head
Точечные головки Pinhead
Ломаные шейки Bent_neck
Асимметричные шейки Asymmetrical
Толстые шейки Thick
Тонкие шейки Thin
Короткие хвосты Short
Ломаные хвосты Bent_tail
Загнутые хвосты Coiled
Параметры % от патологических, расширенный классификатор:  
Сигарообразные головки TaperedP
Грушевидные головки PyriformP
Аморфные головки, тип 1 - грушевидная аморфная. Amorphous1P
Аморфные головки, тип 2 - сигарообразная аморфная. Amorphous2P
Аморфные головки, тип 3 - овальная аморфная. Amorphous3P
Вакуолизированные головки VacuolatedP
Круглые головки без акросомы Round_no_acrosomeP
Круглые, маленькие головки Round_smallP
Головки с маленькой акросомой Small_acrosomeP
Двойные головки Double_headP
Точечные головки PinheadP
Ломаные шейки Bent_neckP
Асимметричные шейки AsymmetricalP
Толстые шейки ThickP
Тонкие шейки ThinP
Короткие хвосты ShortP
Ломаные хвосты Bent_tailP
Загнутые хвосты CoiledP
TZI/MAI при использовании упрощенного классификатора - TZI (1-4 дефекта на сперматозоид), при использовании расширенного классификатора - MAI (может быть больше 4х). TZI
Площадь - среднее значение параметра Площадь головки для нормальных сперматозоидов. N_Area
Длина - среднее значение параметра Длина головки для нормальных сперматозоидов. N_Lenght
Ширина - среднее значение параметра Ширина головки для нормальных сперматозоидов. N_Widht
Удлиненность - среднее значение параметра Удлиненность головки для нормальных сперматозоидов. N_Elongation
Акросома - среднее значение параметра % акросомы для нормальных сперматозоидов. N_Acrosome
Фактор формы, эллипс - среднее значение параметра FFE для нормальных сперматозоидов. N_FFE
Площадь - среднее значение параметра Площадь головки для патологических сперматозоидов. P_Area
Длина - среднее значение параметра Длина головки для патологических сперматозоидов. P_Lenght
Ширина - среднее значение параметра Ширина головки для патологических сперматозоидов. P_Widht
Удлиненность - среднее значение параметра Удлиненность головки для патологических сперматозоидов. P_Elongation
Акросома - среднее значение параметра % акросомы для патологических сперматозоидов. P_Acrosome
Фактор формы, эллипс - среднее значение параметра FFE для патологических сперматозоидов. P_FFE
Фрагментация ДНК сперматозоидов  
Количество измеренных, ДНК - количество сперматозоидов, проанализированных в процессе работы методики Фрагментация ДНК. Используется для контроля качества работы лаборанта. Необходимо проанализировать не менее 500 сперматозоидов. DNA_total
Большой ореол - процент сперматозоидов с большим ореолом после обработки по методу дисперсии хроматина, выделенных в процессе работы методики Фрагментация ДНК. Сперматозоиды с большим ореолом считаются нормальными, с цельной ДНК. BigHalo
Средний ореол - процент сперматозоидов со средним ореолом после обработки по методу дисперсии хроматина, выделенных в процессе работы методики Фрагментация ДНК. Сперматозоиды со средним ореолом считаются нормальными, с цельной ДНК. MediumHalo
Малый ореол - процент сперматозоидов с малым ореолом после обработки по методу дисперсии хроматина, выделенных в процессе работы методики Фрагментация ДНК. Сперматозоиды с малым ореолом содержат фрагментированную ДНК. SmallHalo
Без ореола - процент сперматозоидов без ореола после обработки по методу дисперсии хроматина, выделенных в процессе работы методики Фрагментация ДНК. Сперматозоиды без ореола содержат фрагментированную ДНК. WithoutHalo
Деградировавшие - процент сперматозоидов, не имеющих ореола и характеризующихся неинтенсивной окраской после обработки по методу дисперсии хроматина, выделенных в процессе работы методики Фрагментация ДНК. Деградировавшие сперматозоиды содержат фрагментированную ДНК. Degraded
DFI - индекс фрагментации ДНК, процент сперматозоидов с фрагментированной ДНК: малый ореол + без ореола + деградировавшие. Результат работы методики Фрагментация ДНК. DFI
ДНК, норма результат сравнения с нормальным значением индекса фрагментации ДНК. Значение поля - Да или Нет. statusDNA
Ветеринария и племенное животноводство  
Дозы - количество доз, которые можно приготовить из данного образца спермы. Объем дозы и требуемое количество сперматозоидов в дозе указывается в установках программы. doses
Объем разбавителя - объем разбавителя, который потребуется добавить к данному образцу спермы для получения количества доз, рассчитанного в поле Дозы. diluent_vol
 
     
  В начало  
     
  Запрос демо версии  
     
     
  См. также Спермоанализатор ММС Сперм: требования к микроскопу, цифровой камере, компьютору.  
 
 
© 2018 MMCSoft. All rights reserved.